單克隆抗體制備 服務(wù)編號(hào)：SV2000
一、服務(wù)內(nèi)容
本服務(wù)項(xiàng)目主要是根據(jù)客戶的要求免疫Balb/c小鼠，提取B細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞融合，制備特異性的鼠單克隆抗體。
1、客戶可提供抗原制備鼠源單克隆抗體，抗原可包含：天然蛋白、重組蛋白、細(xì)胞或細(xì)胞提取液、病毒或病原體、菌種或菌體蛋白、小分子多肽、化合物；其中小分子多肽和化合物等半抗原免疫前需偶聯(lián)載體蛋白。
2、客戶可提供蛋白名稱、GeneID、核酸序列、氨基酸序列等信息，我公司根據(jù)客戶的實(shí)驗(yàn)需求設(shè)計(jì)抗原、合成多肽抗原或表達(dá)蛋白抗原，免疫動(dòng)物制備單克隆抗體。
3、可提供抗體標(biāo)記、抗體對(duì)篩選、試劑盒開發(fā)、免疫學(xué)檢測(cè)等增值服務(wù)。
Tip: 請(qǐng)您填寫項(xiàng)目申請(qǐng)表，以便Bioss為您提供更好的技術(shù)服務(wù)。
二、 服務(wù)流程
1、客戶提交單克隆抗體制備請(qǐng)求并明確對(duì)抗體的要求，與公司商定具體的制備項(xiàng)目、數(shù)量和費(fèi)用，雙方簽訂《委托單克隆抗體制備合同》。
2、客戶提供抗原或抗原信息，我公司按照合同要求安排單克隆抗體制備服務(wù)，并在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成制備委托。
3、抗體制備完成后，我公司按照客戶要求純化分裝，免費(fèi)低溫郵寄給客戶，同時(shí)提供抗體制備報(bào)告。
三、 樣品要求
1、客戶提供制備抗體所需蛋白或多肽片段，抗原純度＞85%，數(shù)量＞10mg，濃度＞1mg/ml。
2、客戶提供的抗原信息應(yīng)包含蛋白抗原的英文全稱、種屬信息、GeneID或序列信息；化合物抗原應(yīng)提供化學(xué)結(jié)構(gòu)式、活性基團(tuán)、溶解性等信息。
3、請(qǐng)?zhí)崆罢f明樣品來源和生物危害等情況，或其他任何特殊情況。
四、 單克隆抗體服務(wù)說明
1、由于免疫抗原的多樣性，對(duì)于合成困難的多肽和表達(dá)困難的蛋白，或免疫原性較差的抗原，雙方可商議確制備周期和制備費(fèi)用。如果是抗原（主要是多肽抗原或小分子抗原）的免疫原性差，無法使動(dòng)物產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng)，則合同終止。
2、 細(xì)胞株保存： 細(xì)胞株凍存后，博奧森可免費(fèi)幫客戶保存雜交瘤細(xì)胞3個(gè)月，如果3個(gè)月后，客戶有繼續(xù)保存細(xì)胞株的需求，每個(gè)細(xì)胞株每月收費(fèi)：詢價(jià)（可包年）。
3、 保密承諾：客戶對(duì)其委托制備的單克隆抗體擁有完全的知識(shí)產(chǎn)權(quán)、商業(yè)價(jià)值和使用權(quán)，我公司有為客戶保密的義務(wù)和職責(zé)，承諾嚴(yán)格保護(hù)客戶提供產(chǎn)品信息資料不外泄。
五、單克隆抗體收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)
|
步 驟 |
內(nèi) 容 | 標(biāo) 準(zhǔn) |
時(shí) 間 |
收 費(fèi) |
| 階段Ⅰ | 制備抗原 | a. 客戶提供蛋白抗原，或多肽偶聯(lián)蛋白； | 0 | 詢價(jià) |
| b. 客戶提供多肽，博奧森偶聯(lián)載體蛋白； | 1周 | 詢價(jià) | ||
| c. 原核系統(tǒng)表達(dá)蛋白； | 4周 | 詢價(jià) | ||
| d. 設(shè)計(jì)、合成多肽、偶聯(lián)載體蛋白（15aa左右）； | 2周 | 詢價(jià) | ||
|
e. 磷酸化、甲基化修飾多肽、偶聯(lián)載體蛋白（包括：設(shè)計(jì)修 飾多肽兩條，分別合成及偶聯(lián)，未修飾多肽一條）； |
2周 | 詢價(jià) | ||
| f. 特殊修飾多肽 | 待定 | 詢價(jià) | ||
| 階段Ⅱ | 動(dòng)物免疫和ELISA檢測(cè) | 蛋白抗原免疫5只Balb/c小鼠，最終達(dá)到融合效價(jià)>1:16000 | 6-8周 | 詢價(jià) |
|
修飾多肽抗原設(shè)計(jì)兩條，則分別免疫兩組Balb/c小鼠， 即5只×2=10只，最終取一只達(dá)到融合效價(jià)>1:16000以上 |
6-8周 | 詢價(jià) | ||
| 階段Ⅲ | 融合和篩選 |
選出最佳免疫應(yīng)答的一只Balb/c小鼠的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn) 行細(xì)胞融合，經(jīng)過多次篩選得到需要的雜交瘤細(xì)胞株， 在經(jīng) 過多次測(cè)定細(xì)胞株穩(wěn)定性試驗(yàn)，優(yōu)化出穩(wěn)定分泌特異性抗體 的雜交瘤細(xì)胞株； |
4-8周 | 詢價(jià) |
| 階段Ⅳ |
亞克隆及擴(kuò) 增 |
將已選出的陽性的雜交瘤細(xì)胞株通過有限稀釋法進(jìn)行亞克隆， 最后確定一株陽性克隆做亞型鑒定。 |
4-6周 | 詢價(jià) |
| 階段Ⅴ | 生產(chǎn)腹水 | 選擇2個(gè)陽性克隆株或指定細(xì)胞株大量生產(chǎn)腹水，10-20ml/株 | 3周 | 詢價(jià) |
| 階段Ⅵ | 抗體純化 | a.Protein G純化10mL腹水 | 1周 | 詢價(jià) |
| b.免疫親和層析純化10mL腹水 | 1周 | 詢價(jià) | ||
| 階段Ⅶ |
完成交付產(chǎn)品 |
a.2-5個(gè)亞克隆細(xì)胞株 b.5-10mL腹水×2株 （凍干粉） c.IgG: 1-5mg (免疫純化) （凍干粉） d.10mg (Protein G純化) （凍干粉） e.制備報(bào)告 |
||
| 可提供增值服務(wù) |
博奧森可根據(jù)客戶需求提供下列標(biāo)記、檢測(cè)服務(wù)（詢價(jià)）： 1.抗體標(biāo)記：酶標(biāo)記、生物素標(biāo)記、熒光素標(biāo)記、膠體金標(biāo)記 2.制備抗體親和層析柱（客戶用于提純蛋白） 3.抗體對(duì)篩選，試劑盒開發(fā) 4.免疫學(xué)檢測(cè)：WB檢測(cè)，IHC/IF檢測(cè)，F(xiàn)CM檢測(cè) |
詢價(jià) |
